همسان سازی و بیان نوترکیب دُمین انتهای کربوکسیل پروتئین اینتیمین پاتوژن ehec در باکتری اشرشیا کلی سویه bl۲۱(de۳)

Authors

مصطفی بخشی

mostafa bakhshi imam hossein universityدانشگاه امام حسین (ع) فیروز ابراهیمی

firouz ebrahimi imam hossein universityدانشگاه امام حسین (ع) وحیده شیخ زاده

vahide sheikhzade islamic azad university, quchanدانشگاه آزاد اسلامی واحد قوچان

abstract

چکیده   زمینه و هدف: بخشی از عفونت های روده ای به واسطه پاتوژن هایی به وجود می آ یند               که با مصرف مواد غذایی آلوده وارد سیستم گوارش انسان می شوند. در لانه گزینی باکتری         e. coli o157:h7 در روده بزرگ مجموعه ای از پروتئین ها که برخی از آنها شروع کننده این فرآیند بوده و فقدان آنها مانع از این پدیده می شود، دخیل هستند. هدف از انجام این پژوهش همسان سازی و بیان نوترکیب پلی پپتید انتهای کربوکسیل پروتئین اینتیمین به طول 311 اسید آمینه به عنوان کاندید واکسن علیه e. coli o157:h7 بوده است.   .   روش بررسی : طراحی پرایمر اختصاصی برای ژن eae با استفاده از نرم افزارoligo  نسخه 7 انجام شد و تکثیر ژن به وسیله واکنش pcr از روی dna الگو صورت گرفت. واکنش های هضم آنزیمی و الحاق ژن، درون وکتور pet28a(+) انجام شد. پس از تأیید همسان سازی ژن، بیان نوترکیب پروتئین اینتیمین با استفاده از القاگر iptg صورت گرفت. برای تأیید پروتئین اینتیمین، آنالیز وسترن بلات انجام شد.   یافته ها: همسان سازی ژن eae درون وکتور pet28a(+) به شکل مناسب بین جایگاه های مطلوب انجام شد و پروتئین اینتیمین پس از القا، بیان نوترکیب مناسب و قابل توجهی را نشان داد. آنتی بادی مورد استفاده در وسترن بلات نیز توانست به شکل مناسبی اینتیمین را شناسایی کند.   نتیجه گیری: در این مطالعه، سازه پایدار محتوی ژن eae ساخته شد که بیان نوترکیب قابل توجهی از پروتئین اینتیمین را از خود نشان داد. بنابراین، این سازه را می توان برای تولید پروتئین اینتیمین جهت مطالعات ایمنی زایی علیه e. coli o157:h7 به کار برد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

همسان‌سازی و بیان نوترکیب دُمین انتهای کربوکسیل پروتئین اینتیمین پاتوژن EHEC در باکتری اشرشیا کلی سویه BL21(DE3)

  چکیده   زمینه و هدف: بخشی از عفونت‌های روده‌ای به‌واسطه پاتوژن‌هایی به‌وجود می‌آ‌یند               که با مصرف مواد غذایی آلوده وارد سیستم گوارش انسان می‌شوند. در لانه‌گزینی باکتری         E. coli O157:H7 در روده بزرگ مجموعه‌ای از پروتئین‌ها که برخی از آنها شروع‌کننده این فرآیند بوده و فقدان آنها مانع از این پدیده می‌شود، دخیل هستند. هدف از انجام این پژوهش همسان‌سازی و بیان نوترکیب پلی‌پپتید ا...

full text

مقایسه کمی تولید پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در کشت‌های ناپیوسته و ناپیوسته خوراک‌دهی‌شده باکتری اشرشیا کلی

Background and purpose: The 50 KDa protein (50 µg) in carboxylic domain of the neurotoxin heavy chain (BoNT/A-Hc) recognizes surface receptors on target neurons and this fragment contains the principle protective antigenic determinants. Recently, this fragment has been used as a recombinant vaccine candidate for botulism. The study aimed to compare the evaluation of BoNT/A-Hc production in fed-...

full text

بیان آلبومین سرم انسانی نوترکیب در باکتری اشرشیا کلی سویه (DE3) BL21

سابقه وهدف: آلبومین سرم انسان از مهم ترین ترکیبات سیستم گردش خون می باشد . این پروتئین حامل بسیاری از هورمون ها ومتابولیت ها در بدن بوده و در تثبیت حجم خون و درمان انواع سوختگی ها مؤثر می باشد. چون تهیه آن از پلاسمای خون پرهزینه بوده و همراه با آلودگی به پاتوژن ها ی مختلف است، تولید آن توسط روش های بیوتکنولوژی ضروری به نظر می رسد مواد و روش ها: ژن آلبومین سرم انسان ( HSA ) براساس توالی موجود در...

full text

بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در باکتری اشریشیاکلی به عنوان کاندیدای تولید واکسن بوتولیسم

چکیده زمینه و هدف: بوتولیسم بیماری کشنده‌ای است که توسط نوروتوکسین یکی از هفت نوع کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می‌شود. بخش کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A(BoNT/A-Hc)، از قابلیت بالایی در تحریک سیستم ایمنی برخوردار است که امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می‌رود. هدف از این پژوهش بیان و تخلیص فرم محلول این بخش از نوروتوکسین در باکتری اشریشیاکلی نوترک...

full text

بیان آلبومین سرم انسانی نوترکیب در باکتری اشرشیا کلی سویه (de۳) bl۲۱

سابقه وهدف: آلبومین سرم انسان از مهم ترین ترکیبات سیستم گردش خون می باشد . این پروتئین حامل بسیاری از هورمون ها ومتابولیت ها در بدن بوده و در تثبیت حجم خون و درمان انواع سوختگی ها مؤثر می باشد. چون تهیه آن از پلاسمای خون پرهزینه بوده و همراه با آلودگی به پاتوژن ها ی مختلف است، تولید آن توسط روش های بیوتکنولوژی ضروری به نظر می رسد مواد و روش ها: ژن آلبومین سرم انسان ( hsa ) براساس توالی موجود در...

full text

مقایسه کمی تولید پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم a در کشت های ناپیوسته و ناپیوسته خوراک دهی شده باکتری اشرشیا کلی

سابقه و هدف: پروتئین 50 کیلو دالتونی واقع در انتهای کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ a (bont/a-hc) امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می رود. هدف از این پژوهش بررسی تولید این پروتئین نوترکیب در باکتری اشرشیا کلی در کشت های با تراکم سلولی بالا (ناپیوسته خوراک دهی شده) و مقایسه تولید آن با کشت های ناپیوسته بود. مواد و روش ها: در این مطالعه، رشد باکتری اش...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله دانشگاه علوم پزشکی قم

جلد ۹، شماره ۷، صفحات ۱-۱۰

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023